技術原理
在生物體的生命活動中，蛋白質的功能是通過蛋白質與蛋白質之間的相互作用來實現的。因此，研究新的蛋白互作可以為研究蛋白質的潛在功能提供新的方向。在諸多蛋白互作鑒定實驗中，Pull-down常用于體外蛋白互作檢驗，以及幫助發現新的互作蛋白。Pull-down實驗利用高度純化且富集的誘餌蛋白捕獲在細胞中相互作用較弱或豐度低的靶蛋白，大幅度提高發現新靶蛋白的效率。Pull-down實驗的具體步驟為：表達純化GST、polyHis或Biotin標記的誘餌蛋白，使用固定化親和配體將誘餌蛋白與固相基質穩定結合，再將誘餌蛋白與待測細胞裂解液進行混合孵育，在這一過程中，誘餌蛋白與目標蛋白相互作用并結合在一起，通過清洗除去非特異性結合的雜蛋白，即可獲得與誘餌蛋白相互作用的目標蛋白，再通過質譜分析對目標蛋白進行鑒定。

Pull-down蛋白質鑒定流程

技術特點
l  高通量、自動化程度高、分離能力強；
l  通用性強，可分析蛋白質條帶、免疫共沉淀洗脫液、組織提取液、全細胞裂解液、亞細胞分離組分等多種形式的樣品。
 
樣品要求
l  雙向凝膠膠點：考染、銀染（質譜兼容）點清晰可見；
l  SDS-PAGE膠條：考染、銀染（質譜兼容）條帶清晰可見，單一蛋白質，純度>90% ；
l  蛋白質溶液：單一蛋白質，純度>90%。
 
注意事項
l  為保證高質量的技術服務結果，請您參照以下說明對實驗樣本進行處理和保存:
l  蛋白洗脫液：定量并計算總蛋白量，真空干燥后，密封好管口，冰袋包裝寄送
l  蛋白質條帶（考染）：從凝膠上割取條帶時，避免污染，將條帶放入EP管內，密封好管口，冰袋包裝寄送
l  快遞寄送樣本運輸過程中，可能晃動幅度會比較大，請做好基本運輸防護措施
 
項目報告
l  實驗步驟
l  質譜參數
l  質譜圖片 
l  原始數據
l  鑒定的蛋白質詳細信息
 
Pull-down蛋白質鑒定一站式服務
l  您只需下單-寄送樣品
l  明德正康為您完成-樣品處理-上機分析-數據分析-項目報告