Label Free定量蛋白質組學
技術原理
蛋白質非標記定量技術(Label Free)是通過液質聯用技術對蛋白質酶解產生的肽段進行質譜分析,比較不同樣品中相應肽段的信號強度,從而對肽段對應的蛋白質進行相對定量。
Label Free定量蛋白質組學技術原理圖
Label Free定量蛋白質組學實驗流程圖
Label Free定量蛋白質組學數據分析流程圖
技術特點
l 樣品處理簡單,實驗周期短;
l 適用范圍廣,且對樣品組別數量無限制;
l 無需昂貴的同位素標記試劑,實驗耗費低。
樣品要求
l 常規動物組織(腦、心、肝、脾、肺、腎、肌肉、皮膚等):送樣量>200mg;
l 常規植物組織(幼嫩的根、葉、花、愈傷組織等):送樣量>1g;
l 懸浮/貼壁細胞:送樣量>1x10
7個細胞或體積>50ul細胞沉淀;
l 血漿/血清樣本:送樣量>500ul;
l 微生物菌體:送樣量濕重>100mg或體積>100ul。
注意事項
l 在蛋白質制備過程中使組織始終置于冰上,離心機、離心管等儀器設備要提前預冷,以防蛋白質的降解;
l 要加入適量的裂解液,裂解一定要充分、均勻;
l 植物和動物組織樣本一般采用研磨或勻漿機破碎處理,細胞和菌體樣本一般采用超聲破碎,破碎過程中要避免材料的融化;
l 對預處理好的材料,若不立即進行實驗,應冷凍保存(-80℃),對于易分解的生物大分子應選用新鮮材料制備;
l 對于樣本量需求少的研究,如果組織樣品本身非常細小,可直接裂解,以減少蛋白質的損失。
項目報告
l 實驗步驟
l 液相/質譜參數
l 質譜譜圖
l 蛋白質的鑒定定量信息
l 生物信息分析
Label Free定量蛋白質組學一站式服務
l 您只需下單-寄送樣品
l 明德正康為您完成-樣品處理-上機分析-數據分析-項目報告