MALDI-TOF分子量測(cè)定
技術(shù)原理
MALDI-TOF-MS(Matrix-Assisted Laser Desorption/ Ionization Time of Flight Mass Spectrometry),即基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜,是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種新型的軟電離生物質(zhì)譜,與另一種軟電離技術(shù)電噴霧電離(ESI)相比,MALDI產(chǎn)生更少的多電荷離子,不需要額外的反卷積步驟即可對(duì)蛋白樣品進(jìn)行全譜分析。不過(guò),對(duì)于分子量較大的蛋白質(zhì),平均質(zhì)量與準(zhǔn)確質(zhì)量差別較大,故該技術(shù)適用于分子量低于25kDa的蛋白質(zhì)的完整質(zhì)量測(cè)定。
MALDI-TOF分子量測(cè)定技術(shù)原理圖
技術(shù)特點(diǎn)
l 分析速度快,通量高;
l 分辨率高: ~20000;
l 靈敏度高: ~fmol,amol;
l 質(zhì)量精度高: ~20ppm;
l 分子量測(cè)量范圍大: ~200000Da;
l 對(duì)樣品中的鹽等雜質(zhì)有一定的容忍性。
樣品要求
l 樣品應(yīng)溶解在有較低含量的鹽/洗滌劑的揮發(fā)性溶劑中;
l 請(qǐng)使用足量的干冰運(yùn)輸,并盡量選用較快的郵遞方式,以降低運(yùn)輸過(guò)程中樣品降解的可能性。
項(xiàng)目報(bào)告
l 實(shí)驗(yàn)步驟
l 質(zhì)譜參數(shù)
l 質(zhì)譜譜圖
l 蛋白質(zhì)/多肽分子量信息
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